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賽默飛液質聯(lián)用使用的技術方法介紹

  • 發(fā)表時間2018-06-21
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   賽默飛液質聯(lián)用的靈敏度高,通量性能好——優(yōu)異的高流量性能、降低的離子抑制效應、自清潔離子源探針設計和可靠的接口設計,加速了分析速度;使用更簡便。
  賽默飛液質聯(lián)用作為一種新型的液相色譜技術。利用待測樣品中不同組分所帶電荷性質、數量、組分質量不同,運用色譜技術進行分離分析。能一次性對多組份無機樣品中各種陰或陽離子進行定性、定量分析,有機樣品中有機酸、堿、氨基酸成份進行定性、定量分析,賽默飛離子色譜儀廣泛應用于食品科學、飼科行業(yè)、無機化工、水質分析、農村土壤及植物樣品分析。
  分離的原理是基于離子交換樹脂上可離解的離子與流動相中具有相同電荷的溶質離子之間進行的可逆交換和分析物溶質對交換劑親和力的差別而被分離。適用于親水性陰、陽離子的分離。
  高壓輸液泵將流動相以穩(wěn)定的流速(或壓力)輸送至分析體系,在色譜柱之前通過進樣器將樣品導入,流動相將樣品帶入色譜柱,在賽默飛離子色譜儀中各組分被分離,并依次隨流動相流至檢測器。抑制型離子色譜則在電導檢測器之前增加一個抑制系統(tǒng),即用另一個高壓輸液泵將再生液輸送到抑制器。在抑制器中,流動相背景電導被降低,然后將流動出物導入電導池,檢測到的信號送至數據處理系統(tǒng)記錄、處理或保存。非抑制型離子色譜儀不用抑制器和輸送再生液的高壓泵,因此儀器結構相對比較簡單,價格也相對比較便宜。
  賽默飛液質聯(lián)用提供的信息:
  (1)提供分子量,確定分子式:采用同位素豐度法或高分辨質譜求算分子式。
 ?。?)提供化合物的結構信息:根據分子離子峰及裂解碎片推斷官能團、辨認化合物類型和推導骨架結構等。
 ?。?)復雜混合物的定性定量分析:法分析揮發(fā)油的化學組成,化合物的裂解在一定的條件下遵循一定的規(guī)律,故比較試樣與標準品的質譜圖,可為鑒定是否為同一化合物提供依據。隨著新的離子源不斷出現(xiàn),LC-MS法在結構研究方面發(fā)揮的作用越來越大,而且更加方便快捷。
  賽默飛液質聯(lián)用:靜態(tài)儀器有單聚焦磁質譜、雙聚焦磁質譜;動態(tài)儀器有四極桿質譜、離子阱質譜、飛行時間質譜等。
 ?。?)四極桿質譜:體積小,質量輕,價格低,使用;掃描速度快,適合與色譜連用,定量方面有優(yōu)勢。但只能做到二級質譜(三重四極桿串聯(lián)質譜)。
 ?。?)離子阱質量分析器:當射頻電壓的zui高值逐漸增高時,質荷比從小到大的離子逐次排除并被記錄而獲得質譜圖。離子阱質譜可以很方便地進行多級質譜定性分析,性能好,在剖析物質結構、藥物代謝物研究等方面具有zui強大的功能。
 ?。?)飛行時間質量分析器:離子質量越大,到達接收器所用時間越長,離子質量越小,到達接收器所用時間越短,根據這一原理把不同質量的離子按m/z值大小進行分離??蓹z測的分子量范圍大,掃描速度快,儀器結構簡單。
 ?。?)高分辨質譜:生物質譜要求質量分析器的測定范圍高于普通的有機質譜,多用TOF。離子源常用ESI源和MALDI源(基質輔助激光解吸電離)。
 ?。?)靜電軌道阱質譜:屬于高分辨質譜。此外,分辨率即分開相鄰離子的能力,分辨率越高,越能區(qū)分小的質量差。
  賽默飛液質聯(lián)用除了可以安捷倫液質聯(lián)用所不能分析的強極性、難揮發(fā)、熱不穩(wěn)定性的化合物之外,還具有以下幾個方面的優(yōu)點:
  ①分析范圍廣,MS幾乎可以檢測所有的化合物,比較容易地解決了分析熱不穩(wěn)定化合物的難題;
 ?、诜蛛x能力強,即使被分析混合物在色譜上沒有*分離開,但通過MS的特征離子質量色譜圖也能分別給出它們各自的色譜圖來進行定性定量;
  ③定性分析結果可靠,可以同時給出每一個組分的分子量和豐富的結構信息;
 ?、軝z測限低,MS具備高靈敏度,通過選擇離子檢測(SIM)方式,其檢測能力還可以提高一個數量級以上;
 ?、莘治鰰r間快,HPLC-MS使用的液相色譜柱為窄徑柱,縮短了分析時間,提高了分離效果;
 ?、拮詣踊潭雀撸琀PLC-MS具有高度的自動化。
  賽默飛液質聯(lián)用分析方法的建立:檢查已有的色譜條件是否可以離子化、考慮用何種源、決定用正離子還是負離子、改用揮發(fā)性流動相或分離模式、優(yōu)化離子源參數提高靈敏度、質譜不能檢測沒有離子化的物質。

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